Viabilitatea celulelor, identitatea, sterilitatea și potența explicate
Aceste patru cuvinte apar pe fiecare certificat de analiză și aproape niciodată nu sunt explicate pacienților. Fiecare răspunde la o întrebare diferită: celulele sunt vii, sunt celulele potrivite, produsul este curat și celulele încă funcționează?
Viabilitatea — celulele sunt vii?
Viabilitatea este procentul de celule intacte, vii, din doză. Aceasta este măsurată prin excludere de colorant sau citometrie în flux și contează de două ori: la eliberare și din nou după decongelare, deoarece congelarea și decongelarea omoară unele celule. O doză cotată ca „100 de milioane de celule” înseamnă puțin fără cifra de viabilitate și timpul dintre decongelare și administrare.
Ce măsoară de fapt viabilitatea, identitatea, sterilitatea și potența?
Viabilitatea este procentul de celule vii la momentul eliberării; identitatea confirmă că celulele poartă markerii de suprafață mezenchimali așteptați; sterilitatea confirmă absența creșterii bacteriene sau fungice; potența încearcă să măsoare activitatea biologică, de obicei prin teste de imunomodulare. Primele trei sunt standardizate și de rutină. Testele de potență rămân partea cel mai puțin standardizată a controlului calității terapiei celulare la nivel mondial.
Fapte cheie
- Viabilitate
- % celule vii la eliberare
- Identitate
- Imunofenotip de markeri de suprafață
- Sterilitate
- Fără creștere microbiană în cultură
- Potență
- Test funcțional, încă nestandardizat la nivelul întregului domeniu
Ce știm
- Viabilitatea, identitatea și sterilitatea au metode și praguri acceptate.
Ce rămâne incert
- Nu există un test de potență consensual pentru MSC-uri, prin urmare, comparațiile inter-laborator ale potenței sunt nesigure.
Întrebări revizuite medical
Acest rezumat reprezintă informații medicale generale, nu sfaturi medicale și nu o promisiune de beneficiu. Cifrele sunt intervale citate, confirmate în scris după o revizuire medicală.
Revizuit medical de: Prof. Dr. Erdal Karaöz · Ultima actualizare: · Editorial and evidence policy
Identitatea — sunt celulele potrivite?
Identitatea confirmă că produsul este o populație de celule stromale mezenchimale și nu altceva ce a crescut în cultură. Referința standard sunt criteriile minime ale ISCT: aderența la plastic, expresia CD73, CD90 și CD105, absența markerilor hematopoietici cum ar fi CD34, CD45 și HLA-DR, și capacitatea demonstrată de diferențiere trilinială. Întrebați ce markeri au fost măsurați și la ce procent.
Sterilitatea, endotoxina și micoplasma — este curat?
Contaminarea este modul de eșec cu cea mai clară legătură cu vătămarea pacienților în înregistrările publicate ale clinicilor nereglementate, motiv pentru care aceste trei sunt nenegociabile.
- Sterilitatea — testare validată bazată pe cultură pentru creșterea bacteriană și fungică.
- Endotoxina — măsurată în unități de endotoxină per kilogram; un produs poate fi steril și totuși să provoace o reacție febrilă dacă endotoxina este ridicată.
- Micoplasma — bacterii mici care trec de filtrele standard și nu apar la testele de sterilitate de rutină; testate prin PCR sau cultură.
Potența — încă funcționează?
Potența este un test funcțional: pentru MSC, cel mai frecvent este capacitatea de a suprima proliferarea celulelor T activate, sau secreția măsurată a unui factor relevant, cum ar fi IDO sau PGE2, după stimulare. Celulele care au fost expandate prea mult pot trece testele de identitate și viabilitate, pierzându-și în același timp funcția, deci potența este ceea ce distinge un produs controlat de un simplu număr de celule.
Cum arată o specificație
Un lot eșuat înseamnă că tratamentul dumneavoastră este amânat. Un furnizor care nu a amânat niciodată un tratament din cauza unui eșec de eliberare merită o a doua privire.
| Test | Format specificație tipică | Dacă eșuează |
|---|---|---|
| Viabilitatea | ≥ % definit la eliberare și post-decongelare | Lot respins sau doză recalculată |
| Identitatea | ≥ % definit pozitiv pentru CD73/CD90/CD105; ≤ % definit pentru CD34/CD45 | Lot respins |
| Sterilitate | Fără creștere | Lot distrus |
| Endotoxină | Sub limita UE/kg | Lot distrus |
| Micoplasmă | Nedetectat | Lot distrus |
| Potență | Rezultatul analizei în intervalul definit | Lot respins |
Întrebări frecvente
Un număr mai mare de celule este întotdeauna mai bun?
Nu. Doza este aleasă conform protocolului și, unde este relevant, per kilogram de greutate corporală; dincolo de un anumit punct, mai multe celule adaugă costuri și încărcare la infuzie, mai degrabă decât beneficii, iar viabilitatea și potența contează mai mult decât numărul principal.
Ce este numărul de pasaje și de ce contează?
Numărul de pasaje contorizează de câte ori celulele au fost subcultivate. Pasajele superioare produc mai multe celule, dar riscă senescența și pierderea potenței, motiv pentru care limitele de pasaj sunt scrise în proces.
Citiți în continuare
Solicitați mai întâi o revizuire a dosarului dumneavoastră medical
Dacă oricare dintre acestea vi se aplică, se poate decide doar după ce un medic examinează dosarul dumneavoastră medical. Revizuirea este gratuită și nu există nicio obligație de a călători.
Solicitați o revizuire medicală gratuită